Protéine fluorescente verte

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Green Fluorescent Protein : Protéine fluorescente verte. Issue d'une méduse (Aequorea victoria), cette protéine est intrinsèquement fluorescente. Son gène peut être fusionné in-vitro au gène d'une protéine que l'on souhaite étudier. Le gène recombinant est ensuite réintroduit dans des cellule ou un embryon, qui va alors synthétiser la protéine chimérique fluorescente. On pourra alors l'observer à l'aide d'un microscope à fluorescence, par exemple. Cette méthode permet d'étudier les protéines dans leur environnement naturel : la cellule vivante.

La GFP a été décrite pour la première fois en 1962. Elle est constituée de 238 acides aminés. Le chromophore (centre actif responsable de la fluorescence) est contitué par les chaînes latérales d'une glycine, une tyrosine et une sérine. La GFP non modifiée, dite sauvage (wild type : wGFP) a deux maxima d'excitation. Le premier se trouve avec une longueur d'onde de 395 nm (lumière UV), le deuxième à 475 nm (lumière bleue). La longueur d'onde d'émission maximale est à 504 nm.

Il existe maintenant différents variants de la GFP qui on étés obtenus en modifiant celle-ci par ingénierie génétique. Il existe également d'autre protéines fluorescentes issues d'autre organismes que A.Victoria :

eGFP : fluorescence verte ("enhanced GFP")
CFP : fluorescence cyan (bleu-vert)
YFP : fluorescence jaune (Y pour yellow)
BFP : "Blue fluorescent protein"
DsRed : fluorescence rouge. C'est en réalité une protéine différente, issue d'un corail.

Structure de la GFP:[1]

Il a été montré que la GFP fusionnée à une protéine peut aider le repliement de cette dernière lors de son expression.