Antibiogramme
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Un antibiogramme est une technique de laboratoire visant à tester la sensibilité d'une souche bactérienne vis-à-vis d'un ou plusieurs antibiotiques supposés ou connus.
Le principe consiste à placer la culture de bactéries en présence du ou des antibiotiques et à observer les conséquences sur le développement et la survie de celle-ci. On peut par exemple placer plusieurs pastilles imbibées d'antibiotiques sur une souche bactérienne déposée dans une boîte de Petri. il existe trois types d'interpretation selon le diamétre du cercle qui entour le disque d'antibiotique : souche ou bacterie sensible, intermediaire ou resistante.
Sommaire |
[modifier] Réalisation d'un antibiogramme
[modifier] Matériel
- une gélose muller hinton en boîte de pétri
- disque d'antibiotique
- une souche pure de la bactérie a étudier
- un rateau
- une pipette de 1 ml
- tube à hémolyse
- pipette pasteur
- étalon de mac farland n°3
[modifier] Etapes
[modifier] Réalisation d'une suspenstion
deux solutions possibles
- soit vous disposez d'un bouillon de culture vieux de 24 h que vous pouvez utiliser directement
- soit vous disposez de colonies pures sur un milieu de culture, dans ce cas :
- mettre stérilement de l'eau dans un tube à hémolyse
- prélever les colonies pures et les mettre en suspenstion jusqu'à obtenir la même opacité que l'étalon
- si la supension est trop trouble, rajuster l'opacité en ajoutant de l'eau.
[modifier] Préparation de la gélose
- prendre la Mueller-Hinton (Gélose) et vérifier l'absence d'eau à la surface ; si il en a, la faire évaporer, en approchant la gélose de la flamme
- annoter où seront positionnés les disques d'antibiotiques sur le fond de la boîte (Il faut les éloigner de 1cm du bord minimum)
- (conseil : diviser la boîte autant de fois que vous avez d'antibiotiques, ou utiliser un patron)
- ensemencer la gélose par 1ml de suspension
- étaler le volume avec le rateau du centre vers les bords
- faire sécher
- déposer les disques d'antibiotiques
- incuber 24 a 48h
[modifier] Lecture des résultas
- Mesurer les diamètres des auréoles (zones d'inhibition de croissance de la souche microbienne).
Pour chaque souche microbienne, la sensibilité ou la résistance à un antibiotique est différente. Elle fait appel au notions de c et C.
- c : dose minimale d'antibiotique qu'un malade peut recevoir sans dangers et qui fait effet sur la souche bactérienne.
- C : dose maximale d'antibiotique qu'un malade peut recevoir sans dangers et qui fait effet sur la souche bactérienne.
Ces données sont disponibles sur des abaques .
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